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Funakoshi新產品----AllView PAGE Buffer

時間:2020-01-03 作者:市場部 文章來源: 瀏覽:109

AllView PAGE Buffer是一種新型的SDS-PAGE蛋白電泳緩沖液。這款緩沖液具有一個顯著的特點就是能夠在堿性的Laemmli凝膠(Tris-HCl)中分離不同分子量大小的蛋白質,類似于梯度凝膠的使用。建議使用丙烯酰胺濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠,以分離分子量約在10 kDa250 kDa的范圍的蛋白。電泳后的聚丙烯酰胺凝膠可直接用于CBB染色、銀染或western印跡。


產品特點:

1. 節省成本和時間(不需要梯度凝膠

2. 使用mini gel只需13分鐘即可完成電泳

3. 適用于之后進一步的分析實驗:例如CBB染色、蛋白質印跡等

 

操作步驟:

1. 用超純水將20×AllView PAGE Buffer稀釋至工作液。(例如,取25 mlAllView PAGE Buffer475 ml 的超純水中.

2. 將凝膠放入電泳槽中。

3. 1×AllView PAGE Buffer注入電泳槽中。

4. 點樣以及加入蛋白marker

5. 開始電泳電泳條件設置如下。


Gel Voltage Time
Mini gel (8 × 10 cm, 1 mm thick) 250 V (Constant voltage) 13-15 min


注意:

AllView PAGE Buffer適用于Laemmli凝膠(見下文推薦用法)。

如果使用預制凝膠,則最佳丙烯酰胺濃度可能不同。

AllView PAGE Buffer不可重復使用。

AllView PAGE Buffer20×原液。使用前請稀釋至1倍工作液。

如果觀察到SDS沉淀,使用前將其放在水浴(約37°C)中使其完全溶解。

最佳電泳時間取決于丙烯酰胺濃度、凝膠大小和電壓。

建議使用MW Marker作為標記。(e.g. DynaMarker? Protein MultiColor Stable II, Code#DM660).

 

推薦用法:

建議丙烯酰胺的濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠,以分離分子量大概10 kDa250 kDa范圍的蛋白。特別是在需要分離低分子量蛋白質(10kda~30kda)的情況下,建議使用10%的分離膠。

1. 準備膠 (Laemmli’s method)  

1,聚丙烯酰胺分離膠和濃縮膠配方(2 mini gels

 

Stacking gel (6 ml)

Resolving gel (15 ml)

Gel percentage

3%

6%

10%

Ultrapure water

3.9 ml

8.05

6.05

1.5M Tris-HCl (pH8.8)

1.5

3.75

3.75

30% Acrylamide/Bis solution

0.6

3.0

5.0

10% SDS

0.06

0.15

0.15

TEMED

0.003 (3 μl)

0.00375 (3.75 μl)

0.00375(3.75 μl)

10% APS

0.06

0.05

0.05

 

上圖為 DynaMarker? Protein MultiColor Stable II, Code#DM660

 

2.電泳圖

AllView PAGE BufferLaemmli electrophoresis running bufferTris-Glycine-SDS)的使用區別在于蛋白質遷移率不同。通過對AllView PAGE BufferLaemmli gelTris-HCl)的結合使用,可以像梯度凝膠一樣分離大范圍的蛋白質大小如下圖。

 

訂購信息

貨號

產品名稱

規格

DS520

AllView PAGE Buffer

500 ml (20 × stock solution)

 


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